TI质粒可以作为载体的条件

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/04 08:49:00
TI质粒可以作为载体的条件

TI质粒可以作为载体的条件
TI质粒可以作为载体的条件

TI质粒可以作为载体的条件
重要因素:
其特定部位与植物核内DNA组合来表达信息,使植物细胞肿瘤化.即此质粒既有在细菌中表达的基因,又有在高等植物中表达的基因,这是很独特的.
一般因素:
质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的.与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作.大多质粒载体带有一些多用途的辅助序列,这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、产生用于序列测定的单链DNA、体外转录外源DNA序列、鉴定片段的插入方向、外源基因的大量表达等.一个理想的克隆载体大致应有下列一些特性:(1)分子量小、多拷贝、松弛控制型;(2)具有多种常用的限制性内切酶的单切点;(3)能插入较大的外源DNA片段;(4)具有两个以上的遗传标记物,便于鉴定和筛选.(5)对宿主细胞无害.常用的质粒载体大小一般在1kb至10kb之间,如PBR322、PUC系列、PGEM系列和pBluescript(简称pBS)等.
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一般载体所具备的基本条件为:
1、能自我复制,并具有一定的拷贝数;
2、带有抗性基因,便于筛选和鉴定;
3、在适当的位置有单酶切位点;
4、带有强启动子,驱动目的基因在宿主细胞内高效表达。
Ti质粒是诱导植物肿瘤的质粒,其结果中的可转移DNA(T-DNA)顺序有促进Ti质粒转移至植物细胞染色体DNA(cDNA)中的作用。T-DNA...

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一般载体所具备的基本条件为:
1、能自我复制,并具有一定的拷贝数;
2、带有抗性基因,便于筛选和鉴定;
3、在适当的位置有单酶切位点;
4、带有强启动子,驱动目的基因在宿主细胞内高效表达。
Ti质粒是诱导植物肿瘤的质粒,其结果中的可转移DNA(T-DNA)顺序有促进Ti质粒转移至植物细胞染色体DNA(cDNA)中的作用。T-DNA由20kb组成,可随机整合至植物细胞cDNA中。Ti质粒为环状双螺旋DNA,由185kb组成。
T区携带的基因有两个功能:一是决定植物形成冠瘿瘤;二是控制冠瘿碱的合成。所以Ti质粒是诱发植物肿瘤的质粒。根据Ti质粒能够进入植物细胞并能整合到植物染色体DNA分子中的功能,将外源基因装入到Ti质粒,形成杂合Ti质粒并转入农杆菌中,然后该农杆菌感染植物细胞,从而形成转基因植物。

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看看书本吧,一般要三个条件
有酶切点(可插入),有标记基因(可检测),能复制且不影响宿主细胞的正常生活