PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激.

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 11:28:20
PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激.

PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激.
PCR产物的酶切问题
我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激.

PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激.
PCR-RFLP技术我曾经做过,说实话这并不是一个稳定有效的鉴定方法,当时我也遇到和你一样的问题.
有这样的情况,一种是你选择酶的时候选择错误,在你该段基因上根本不存在这个酶切位点.
二是你根据别人发表序列确定了存在该酶切位点,但是因为基因突变等情况,导致你的病例酶切位点发生变化.
三是即使你病例存在了酶切位点,因为酶切体系的不合适,比如底物浓度过高,酶失活等,使得酶切失败.

你做了酶切的阳性对照没有,说不定你的酶切体系不对或者酶过期了。如果还不行,建议你回收PCR产物测序,看酶切位点是否突变了。

肯定是没有切点
应该先弄清楚序列看看到底有没有切点
如果序列比较少,有没有切点,用眼瞅一下就可以了
如果序列比较多,可以用酶切位点分析工具
http://www.yelinsky.com/blog/archives/278.html
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PCR产物酶切的问题我做的是PCR-RFLP法分析SNP:引物是参照文献设计,takara合成的.订购的是takara的Taq酶.PCR 条件也是文献中的,1%琼脂糖电泳显示PCR产物大小为290bp.用文献报道的Msp I文字1μL,PCR产物 PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激. 对PCR扩增的产物进行酶切的方法? 如何对PCR扩增的产物进行酶切? 如何对PCR扩增的产物进行酶切? pcr产物酶切Fermentas公司的内切酶说的PCR产物是质量ug,请问我要怎么样换算成体积ul 酶切产物/PCR产物回收 模版DNA浓度低怎么办 假如用PCR产物再做一次PCR 那PCR缓冲液那些是一样的嘛 pcr产物不纯化直接酶切连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响哦~ PCR产物保存问题用于纯化的PCR产物(DNA)零下20度可以保存多长时间? 我loading buffer直接加到PCR产物中了,不知道影不影响PCR产物直接纯化PCR产物出来后 直接加了loading buffer,然后取5ul走的电泳,剩余的PCR产物含有loading buffer,不知道能不能直接用PCR纯化试剂盒纯化,l PCR产物问题如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~marker是DL2000而第二次是高保真酶跑出来的电泳图,没有我的目的产物,只有很多二聚体这是为什么呢?我用的引物都是一样的~2次PCR PCR产物跑电泳带很暗的原因? ssr的PCR扩增产物如何检测 PCR产物直接测序的原理 如何知道PCR产物的大小 怎样检验pcr产物的纯度 pcr需要注意的问题