使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用RT

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 01:23:22
使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用RT

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使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用
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使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用RT
最佳浓度是1mM,但是这样非常容易形成包涵体.如果包涵体可以用的话,比如做抗体,那么当然是蛋白越多越好,不过大多数时候我们需要蛋白的可溶性表达,所以这个浓度也需要摸索.如果你的蛋白必须是可溶性表达的话,那么建议你用较低浓度的IPTG,我用过最低浓度是0.1mM,效果不错,当然这也需要你延长诱导的时间.如还有问题请加QQ,414181542.

另外一个是叫做本底表达,就是你导入后目的蛋白在未诱导情况下也会表达,这可能是大肠杆菌产生了类似IPTG的物质,这个在原核表达中是很常见的,如果本底

减低本底表达一是别用LB,换没有乳糖残存的培养基。二是换个更严谨的启动子……

在细菌OD600值为1时加终浓度100ug/ml的IPTG.

使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用RT 您那有BL21(DE3)plysS菌株吗,可以邮寄些给我吗, BL21(DE3)plyss 表达T7溶菌酶的具体作用啊?是怎样降低不低基因背景的? 实验室要是使用博凌科为的BL21(DE3)感受态细胞会很繁琐吗?求教 我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢? BL 21蛋白表达系统疑问请看:Chaperone Competent Cells BL21有五种类型,非常适合于表达外源蛋白.但该产品不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系:如pET系列,因为作为宿主E.coli BL21株不表达T7 RNA聚合 博凌科为的BL21(DE3) 感受态细胞 怎么样? BL21(DE3)pLysS感受态细胞,哪家的产品好, pet32a转入bl21(de3)plysS怎么不长菌?什么原因? 运用dsRNA基因沉默的引物设计问题我想使用T7 RiboMAX Exp ress RNAi System试剂盒,体外转录出用于RNA干扰的dsRNA.之前以cDNA为模板,设计插入T7启动子的引物,合成DNA模版.想问,这个插入T7启动子引物设计 启动子与引物的区别是什么,如T7启动子与T7引物,T7引物是该启动子的互补序列吗?那为什么要以T7启动子的互补序列为引物呢?不吝赐教. 原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗?我在做芽孢杆菌一个蛋白的异源表达,基因克隆了,用的pET-28a,表达菌株是BL21(DE3)pLysS,测序也没有问题,25℃、30℃、37℃都诱导了,IPTG为0.5mM.可就是不 英语翻译Escherichia coli BL21(DE3) chromosome contains a group II capsular gene cluster pET-his载体为什么必须在BL21(DE3)菌,而不能在DH5α中表达? 请高手给该段序列加酶切位点MluI、T7启动子序列和上游引物(方向:5‘-MluI-T7-…3’)!GAAAATAGTGCCCAAAGAGTCTGAGAGAGACAGCAAGACTAAGCCACCGGATGCTACGATAGTGGTAGATGGAGTTAAATACCAGGTAAAGAAGAAGGGGAAAGTCAAGAGTAAAAACACGCAGGACGGTTTATATCA 表达型大肠杆菌BL21(DE3)PLySs感受态细胞转化培养BL21(DE3)PLySs感受态细胞在转化培养时,如果用SOC培养基,需要另外加氯霉素吗?如果选用BL21(DE3)感受态细胞对于PE28+载体转化表达来说,有没 请问T7启动子能否在真核生物细胞中启动表达,CMV启动子又能否在原核细胞中启动表达?针对表达载体而言.T7算不算原核启动子? 关于表达质粒转化BL21(DE3)的问题用表达空载体pET28a和重组表达质粒pET4c9转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,在含有卡那霉素的琼脂平板上选择培养,挑取pET28a和pET4c9转化菌落,请教各位大侠,如果挑取?