关于土壤细菌基因组DNA做PCR的问题!各位能帮上忙的大侠们好,我用酚仿法从土壤中提取出基因组DNA用于做PCR,但就是没有产物,但是另外从大肠杆菌中提取的DNA扩增没有任何问题,效果非常好.所

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/02 11:09:29
关于土壤细菌基因组DNA做PCR的问题!各位能帮上忙的大侠们好,我用酚仿法从土壤中提取出基因组DNA用于做PCR,但就是没有产物,但是另外从大肠杆菌中提取的DNA扩增没有任何问题,效果非常好.所

关于土壤细菌基因组DNA做PCR的问题!各位能帮上忙的大侠们好,我用酚仿法从土壤中提取出基因组DNA用于做PCR,但就是没有产物,但是另外从大肠杆菌中提取的DNA扩增没有任何问题,效果非常好.所
关于土壤细菌基因组DNA做PCR的问题!
各位能帮上忙的大侠们好,我用酚仿法从土壤中提取出基因组DNA用于做PCR,但就是没有产物,但是另外从大肠杆菌中提取的DNA扩增没有任何问题,效果非常好.所以可以说明是模板出了问题,可是模板到底出了什么问题,还请教大侠们告知一二,附图是我通过胶回收得来的土壤细菌的模板DNA,23000的marker!
感激!

关于土壤细菌基因组DNA做PCR的问题!各位能帮上忙的大侠们好,我用酚仿法从土壤中提取出基因组DNA用于做PCR,但就是没有产物,但是另外从大肠杆菌中提取的DNA扩增没有任何问题,效果非常好.所
Mmmmmm,这个问题啊,从你的描述确实是模板的问题了,导致PCR失败的模板问题无非两种：浓度和纯度,LS的兄弟说的不错,模板浓度太大不行,稀释做个梯度看看也许管用；另一方面,纯度的控制就没这么简单了,从土壤中提取的基因组中包括肯定不止一种微生物的DNA,对任何一种微生物DNA来说,其他微生物的DNA都算是杂质而且无法去除,同时氛氯仿法提取的DNA通常纯度不会太高,尤其你的介质又是土壤,难免有其他杂质除不干净,建议你用试剂盒纯化一下你的模板,我常用的纯化基因组的试剂盒是OMEga的PCR产物纯化试剂盒,其实对模板进行稀释,也就是对杂质进行稀释,以期达到一种平衡,使得模板能够作用而杂质不起作用,另：我不是做广告的

做pcr模板量不宜过大，你可以尝试做几个不同的组别对照，加不同的模板量，其他条件不变，来看看加多少量合适。看你的电泳图，总dna的量应该是很大的，所以20ul里加0.5甚至更少量的模板应该就够了。

1。土壤杂质多，酶抑制剂自然多，我们以前做粪便，都用玻璃乳吸附法纯化DNA的。你最好改变模板提取方法，比如玻璃乳吸附DNA。
2。大肠杆菌能做出来PCR结果，你能肯定土壤中保证存在同样的大肠杆菌模板么？如果模板不同 你必须改变相应的引物。（仅提个醒）。你从土壤中提取的DNA模板究竟是什么物种的模板？改变引物试试看哈。...

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1。土壤杂质多，酶抑制剂自然多，我们以前做粪便，都用玻璃乳吸附法纯化DNA的。你最好改变模板提取方法，比如玻璃乳吸附DNA。
2。大肠杆菌能做出来PCR结果，你能肯定土壤中保证存在同样的大肠杆菌模板么？如果模板不同 你必须改变相应的引物。（仅提个醒）。你从土壤中提取的DNA模板究竟是什么物种的模板？改变引物试试看哈。

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关于土壤细菌基因组DNA做PCR的问题!各位能帮上忙的大侠们好,我用酚仿法从土壤中提取出基因组DNA用于做PCR,但就是没有产物,但是另外从大肠杆菌中提取的DNA扩增没有任何问题,效果非常好.所 关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?3.PCR反应程序细菌16SrDNA V3区扩增：95°C 5min；93°C 30 土壤细菌总DNA pcr模板量一般多少?小弟新手,最近提取土壤细菌总DNA,pcr一直P不出条带,我感觉多数是模板的问题,请各位大侠们指点一下,一般模板量是多少? 我要做PCR-DGGE的实验来分离细菌,但是不知道是要提取细菌的基因组DNA还是总DNA呢?总DNA是包括染色体DNA和质粒DNA吗?我要是想把混合在一起的几种细菌定量出来的话需要提取细菌的什么DNA呢? 细菌基因组DNA可以用纯化PCR产物的试剂盒提纯吗之后我是想做定量PCR的,我做的是泥水混合物,是泥样多的时候呢,检测出来反而比较少~我想是不是有抑制物的问题.想提纯看看~市面上好像都是 提取细菌DNA检测到有条带,PCR后无条带;而基因组DNA检测到无条带的,PCR后却有条带.怎么解释? 关于细菌基因组PCR的问题向做过细菌PCR的请教：体系一般都是多少,退火温度呢我们做过退火温度有48度、43度、56度,引物是通用引物1492R和27F,模板和引物都没问题,是不是引物和模板不匹配,10 植物基因组DNA,PCR没有条带这是我提的植物基因组DNA ,PCR没有条带,帮我看看基因组提的有没有问题,怎么才PCR能出来呢 细菌基因组DNA 的PCR扩增问题我提取了革兰氏阴性菌的基因组DNA并用几种不同的引物对其进行PCR扩增,意在扩增一段特定的基因片段,其中一对引物扩增出了两条带,一条500bp左右,为目的条带,另 土壤细菌DNA 小弟我提土壤总DNA准备PCR细菌中一种酶的基因,可以半个月过去了,一直P不出来条带,我自己感觉模板存在问题的可能性最大,请有经验的大侠们指点一下,土壤提细菌总DNA量一般多少 人基因组DNA模板,PCR时条件怎么设置?我需要做重叠PCCR模板是基因组DNA,但没有这方面的经验,需要同道人士帮忙, 细菌的基因组DNA包不包括质粒DNA? 博凌科为土壤基因组DNA快速提取试剂盒（离心柱型）是如何作用于细菌样品,进而提取DNA的 请问普通的细菌基因组DNA提取试剂盒可以用来提取结核分枝杆菌基因组DNA吗? 土壤基因组DNA提取试剂盒哪家的比较好啊? 我想请问下 提取全基因组DNA后做SNP 所用的PCR技术是不是普通的半定量的PCR? 使用DNA基因组提取试剂盒提取的DNA是否含有线粒体DNA,可是用于线粒体DNA的PCR扩增么 关于做PCR的模板稀释做普通pcr所用的模板一般都是原液稀释几倍?我的DNA是提的土壤里微生物的.是不是越浓做出来的效果越好?是不是跟DNA里面的PCR抑制物质有关呢?