关于目的基因的检测与鉴定.第一步,DNA分子杂交技术,为什么可以证明,目的基因插入染色体中了呢?如题.假如我将重组质粒导入受体细胞中.假如,目的基因并没有整合到受体细胞染色体DNA上.那

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/30 01:39:46

关于目的基因的检测与鉴定.第一步,DNA分子杂交技术,为什么可以证明,目的基因插入染色体中了呢?如题.假如我将重组质粒导入受体细胞中.假如,目的基因并没有整合到受体细胞染色体DNA上.那
关于目的基因的检测与鉴定.第一步,DNA分子杂交技术,为什么可以证明,目的基因插入染色体中了呢?
如题.假如我将重组质粒导入受体细胞中.假如,目的基因并没有整合到受体细胞染色体DNA上.那我们此时用DNA分子杂交技术,就得不到杂交带么?DNA分子杂交技术是把【转基因生物的基因组DNA提取出来】.所谓【基因组DNA】就不算质粒么?

关于目的基因的检测与鉴定.第一步,DNA分子杂交技术,为什么可以证明,目的基因插入染色体中了呢?如题.假如我将重组质粒导入受体细胞中.假如,目的基因并没有整合到受体细胞染色体DNA上.那
假如将重组质粒导入受体细胞中,目的基因并没有整合到受体细胞染色体DNA上,当然就得不到杂交带了.方法是：用同位素标记的目的基因的单链做探针与可能插入目的基因的染色体dna杂交,洗去未结合的探针,结合的不被洗去.再通过同位素的放射性,如果存在杂交,将在显影的胶片上将呈现痕迹,则是插入目的基因了;如果没有杂交,探针都被洗去,胶片不出现特定痕迹---一条黑色条带（杂交带）,那么就可以判断目的基因未插入染色体.
基因组DNA就是指能够编码蛋白质的整套基因.一般说道基因组DNA指的是核基因组DNA,对于细菌就是拟核中的DNA.是组成生物基因组的所有DNA.
质粒是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子.

首先，检测目的基因的方法有很多种，比如菌液pcr，抗生素筛选，GFP，流式细胞术，酶标，western blot等等，不仅仅是DNA分子杂交。
其次，如果一定要用分子杂交，要提取DNA的话，也可以提取质粒DNA呐~
然后，在提取基因组DNA的时候，由于基因组和质粒的DNA存在方式不同，一般不会混杂质粒DNA。...

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1、将受体与重组质粒结合。涂在固态培养基培养1晚上---大约10小时。大约如果是大肠杆菌的话，20分钟一代。这时候，固态培养基上有很多单克隆。
2、将8个单克隆用牙签挑出来（数量你定，看转化率了，有时候导入不成功；运气好的话，挑一个单克隆就能得到你想要的东西），用液体培养基培养，过夜，极大的增加细胞的数量。（杂交需要大量DNA。提DNA需要大量细胞）
3、把所有所有dna都提取出来。进行琼脂糖凝胶电泳。质粒DNA和核DNA由于分子大小不同，所以分开了。质粒由于分子量小，所以跑得快而且相差很远。（如大肠杆菌核DNA 20Kb，质粒小的1.5Kb大的也就10Kb）共两条带。
4、杂交。杂交完毕后，看核DNA的条带那里～有杂交的话有荧光！

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