我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?我可不可以在起始密码子前面的一段序列中设计引物?我以前是这样设计的,但是一直都扩不出来,怎么办?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 22:38:04
我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?我可不可以在起始密码子前面的一段序列中设计引物?我以前是这样设计的,但是一直都扩不出来,怎么办?

我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?我可不可以在起始密码子前面的一段序列中设计引物?我以前是这样设计的,但是一直都扩不出来,怎么办?
我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?
我可不可以在起始密码子前面的一段序列中设计引物?我以前是这样设计的,但是一直都扩不出来,怎么办?

我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?我可不可以在起始密码子前面的一段序列中设计引物?我以前是这样设计的,但是一直都扩不出来,怎么办?
如果只想做序列的克隆,那么引物往两端延伸没问题.
如果要做蛋白表达的话起始端必须是起始密码子.引物不可以在起始密码子之前,否则影响表达起始.
扩不出来的话,首先分析一下序列,是否GC含量较高.
然后尝试一下延长引物序列,用软件分析一下两引物的互补性,防止形成引物二聚体.
再然后就是做一下温度梯度,用好一点的酶等等.

我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?我可不可以在起始密码子前面的一段序列中设计引物?我以前是这样设计的,但是一直都扩不出来,怎么办? 如何设计real-time PCR 引物请问我想设计一个基因的引物,既能扩增人类也能扩增小鼠的该基因,该如何操作呢? 同一基因用两对引物扩增的目的是什么 我想问根据同一个基因设计的两个引物,都在小麦中扩增,扩增片段大小是否一样? 关于引物和目的基因的关系.针对某基因设计的同一对引物在不同人的基因组中扩增的片段一定一样吗?在基因诊断时,已知致病基因序列设计的引物也能同时扩增正常人该段基因吗.比如镰状细 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? PCR技术扩增目的基因中的引物有什么作用?是不是能控制复制次数? 利用PCR技术扩增目的基因,引物是什么?引物是什么?有什么作用?不要说得太简洁, 是否目的基因在PCR扩增时不用在引物中加入酶切位点,就可与pGEM-T载体连接?为什么? 同源性很低的基因如何扩增?我想扩增细菌中的一段功能基因,但是这个基因在各细菌中的保守性很低.我想知道该怎么设计引物去扩?但是保守性很低,设计简并引物都很困难,即使扩增出来之后B PCR的扩增基因的引物是什么 PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增.设计一个引物,下游设计一个引物,上下游引物间想穿插(包含一定共同片段),这样成吗. PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我最终是要拿到这个未知基因的全长.我想选择最长的目的条带去测 PCR技术扩增目的基因是否一定要编码区的基因 谁能通俗易懂的给我解释一下PCR反应过程中,引物与模板如何结合?扩增出来的是上下游引物之间的片段呢?还是就是引物片段?最终目的不是扩增目的基因,观察多态性的. RNA反转录后,分别用内参引物和目的基因引物扩增,目标基因有条带,内参没有扩出来,问题可能处在什么地方 荧光定量PCR相对定量,目的基因引物浓度不同,b-action需要以不同浓度扩增2次吗? 关于PCR的问题:PCR如果目的基因扩增出来了是不是条带中的引物二聚体就没有了呀?